1. ELISA實驗中樣品都要做復孔或三孔，然后計算每個濃度標準品的平均OD值，復孔的變異系數應該小于20%。

　　2. 平均OD值減去空白孔的OD值。

　　3. 制作標準曲線。

　　以減去本底后的OD值為X軸，標準品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數、對數、四參數方程等)并從中選擇一條合適的方程。要想檢驗某條曲線是否與表中數據吻合，可以將標準品的濃度作為未知數，將對應的OD值帶入該方程，計算出標準品的濃度，得到的結果應該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度高的那條曲線。

　　以下是CurveExpert1.4的使用過程：

　�、� 將OD值和標準品濃度數據復制粘貼到表格中

　�、� 生成和選擇標準曲線

　�、� 通過曲線計算樣品濃度

　　輸入OD值，點擊“計算”按鈕，得到樣品的準確濃度。

　　或者得到相關方程，通過excel來計算濃度。

　　如果需要導出方程，可點擊“復制”，粘貼至excel中。

　�、� 對于OD值落在標準曲線之外的情況

　　如果樣品的OD值超過標準曲線的高值，在實驗前應該先將樣品稀釋從而得到準確的濃度。樣品應該是計算出的濃度乘以稀釋倍數。